교토대학의 학부생에 의한 연구팀 iGEM Kyoto의 멤버, Alexander Y. Liu씨, 코가 다이쇼씨, 합야 토시히로씨의 3명은 DNA 클로닝을 위한 새로운 반응액을 개발했다. 두 효소를 혼합하는 것만으로 비용은 비싼 시약의 수천분의 2.성능도 시판품과 동등했다.
DNA 클로닝은 분자 생물학의 핵심 기술로 DNA를 자르는 가위와 풀을 사용한 복잡한 공정이 필요했다.최근 '상동 재조합'을 이용한 심플한 방법이 사용되게 되었지만, 고가의 시약이 필요하기 때문에 많은 연구실의 예산을 압박하고 있다.
연구팀은, 예산이 적기 때문에 고가의 시약을 사는 것을 주저하고, 「스스로 새로운 반응액을 만들 수 없는가」라고 생각해 연구를 개시.고가의 시약을 사용하지 않고도, 대장균으로부터 특별한 방법으로 추출한 용액 「SLiCE」를 사용하면 「상동 재조합」을 할 수 있다고 하는 보고에 주목해, 호타바타 신조교와 공동으로 「SLiCE」의 유효 성분의 특정 에 도전했다.
연구 결과, 2개의 효소(엑소뉴클레아제 III(ExoIII)와 엑소뉴클레아제 T(ExoT))가 활성을 담당하고 있는 것이 판명. 2개의 효소를 혼합하는 것만으로 무수한 단백질이 녹아든 SLiCE의 활성을 완전 재현하는 데 성공.주된 활성을 담당하는 ExoIII는 시판의 것을 구입했지만, 희석하여 사용하기 때문에, 80만엔의 시약을 사면 1만회의 재조합 반응을 실시할 수 있다(시판 키트는 1,500회 반응당 XNUMX엔 정도 ).고가의 키트에 필적하는 칵테일(혼합물)을 매우 염가로 만들 수 있게 되었다.
생성된 칵테일은 매우 안정한 조건으로 저장할 수 있고, 장기간 보관해도 활성은 감소하지 않았다.이번 성과는 전세계에서 이루어지는 DNA 클로닝의 비용을 대폭 삭감시키는 것으로 이어질 것으로 기대된다고 한다.
